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關(guān)于免疫熒光ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)詳解
更新時(shí)間:2013-11-29   點(diǎn)擊次數(shù):1543次

  將熒光素標(biāo)記在相應(yīng)的抗體上,直接與相應(yīng)抗原反應(yīng)。ELISA試劑盒其優(yōu)點(diǎn)是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點(diǎn)是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。

  免疫熒光ELISA試劑盒體技術(shù)(熒光顯微鏡技術(shù))抗原抗體反應(yīng)后,利用熒光顯微鏡判定結(jié)果的檢測方法??乖贵w反應(yīng)后,利用特殊儀器測定熒光強(qiáng)度而推算被測物濃度的檢測方法 。
(1)熒光物質(zhì)  許多物質(zhì)都可產(chǎn)生熒光現(xiàn)象,ELISA試劑盒但并非都可用作熒光色素。只有那些能產(chǎn)生明顯的熒光并能作為染料使用的有機(jī)化合物才能稱為免疫熒光色素或熒光染料。
(2)異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,F(xiàn)ITC)為或橙結(jié)晶粉末,易溶于水或酒精等溶劑。分子量為389.4,zui大吸收光波長為490--495nm,zui大發(fā)射光波長520--530nm,呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光,結(jié)構(gòu)式如下:   有兩種同分異結(jié)構(gòu),其中異構(gòu)體Ⅰ型在效率、穩(wěn)定性、與蛋白質(zhì)結(jié)合能力等方面都更好,在冷暗干燥處可保存多年,是應(yīng)用zui廣泛的熒光素。

  免疫熒光ELISA試劑盒技術(shù)特點(diǎn):
該技術(shù)的主要特點(diǎn)是:特異性強(qiáng)、敏感性高、速度快。
主要缺點(diǎn)是:非特異性染色問題尚未完*,結(jié)果判定的客觀性不足,技術(shù)程序也還比較復(fù)雜。    熒光免疫法按反應(yīng)體系及定量方法不同,還可進(jìn)一步分做若干種。與放射免疫法相比,熒光免疫法無放射性污染,并且大多操作簡便,便于推廣。國外生產(chǎn)的TDM用試劑盒,有相當(dāng)一部分即屬于此類,并且還有TDM熒光偏振免疫分析用的自動分析儀生產(chǎn)。   ELISA試劑盒由于一般熒光測定中的本底較高等問題,熒光免疫技術(shù)用于定量測定有一定困難。近年來發(fā)展了幾種特殊的熒光免疫測定,與酶免疫測定和放射免疫分析一樣,在臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用。

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